Ya, baris subjek e-mel biasanya menggunakan huruf besar. Mengikut peraturan penggunaan huruf besar standard, huruf pertama setiap perkataan dalam baris subjek biasanya menggunakan huruf besar, kecuali untuk artikel (cth., “a,” “an,” “the”), kata hubung koordinat (cth., “dan,” “tetapi, ” “atau”), dan preposisi (cth., “dalam,” “pada,” “dengan”) melainkan ia adalah perkataan pertama atau terakhir baris subjek. Sebagai contoh, baris subjek e-mel dengan huruf besar yang betul boleh: “Peringatan Penting: Bertemu Esok Jam 10 Pagi” Perlu diingat bahawa sesetengah individu atau organisasi boleh memilih untuk menggunakan huruf besar kecil (hanya menggunakan huruf besar pada baris subjek) atau gaya huruf besar alternatif untuk tujuan penjenamaan atau gaya. Walau bagaimanapun, konvensyen standard adalah menggunakan huruf besar pertama setiap perkataan dalam baris subjek.